Аминокислоты, пептиды и белки - Дэвени Т., Гергей Я. 1976

Анализ концевых групп и ступенчатая деградация белков и пептидов
Определение N-концевых групп 2,4-динитрофторбензольным методом
Идентификация ДНФ-аминокислот тонкослойной хроматографией

Тонкослойная хроматография успешно применяется для идентификации ДНФ-аминокислот. По сравнению с хроматографией на бумаге этот метод более чувствителен и требует меньших затрат времени. Чаще всего смеси разделяют в силикагеле в следующих системах растворителей [2]: а) толуол — пиридин — этиленхлоргидрин — аммиак (0,8 М) (100 : 30 : 60 : 60); эта система гетерогенна, верхняя фаза используется для хроматографии, нижняя — для уравновешивания адсорбента; б) хлороформ—бензиловый спирт—уксусная кислота (70 : 30 : 3); в) бензол — пиридин — уксусная кислота (80 : 20 : 2); г) хлороформ—метанол—уксусная кислота (95 : 5 : 1). Для идентификации достаточно примерно 0,2—0,5 мкг ДНФ-аминокислоты. Распределение ДНФ-аминокислот при двумерной хроматографии в различных системах растворителей показано на фиг. 61.

Фиг. 61. Идентификация ДНФ-амииокислот тонкослойной хроматографией на силикагеле.

Раствор 1: толуол — пиридин — этиленхлоргидрнн — 0,8 М аммиак (100 : 30 : 60 : 60). Раствор 2: хлороформ — бензиловий спирт — уксусная кислота (70 : 30 : 3). Раствор 3: бензол — пиридин — уксусная кислота (80 : 20 : 2). Раствор 4: хлороформ — метанол — уксусная кислота (95 : 5 : 1). ДНА — динитроанилин, ДНФ — динитрофеиол.