Аминокислоты, пептиды и белки - Дэвени Т., Гергей Я. 1976
Хроматография белков
Хроматография белков на колонке с катионообменной целлюлозой
Фракционирование белков сыворотки крови на колонке с КМ-целлюлозой
А. Подготовка колонки. Колонку КМ-целлюлозы готовят так же, как колонку Ф-целлюлозы, но отмывка ионообменника несколько отличается; ее проводят следующим образом: 0,5 М NaOH, дистиллированной водой, 0,1 М уксусной кислотой, дистиллированной водой и стартовым буферным раствором.
Б. Хроматография. Фракционирование происходит так же, как и на колонке Ф-целлюлозы. Для последовательных ступеней элюирования рекомендуется применять следующие буферные растворы: 0,02 М ацетатный буферный раствор pH 4,6 (стартовый), 0,05 М ацетатный буферный раствор pH 5,2, 0,08 М ацетатный буферный раствор pH 6,0, 0,1 М фосфатный буферный раствор pH 7,0 и 0,1 М фосфатный буферный раствор +0,5 М NaCl pH 9,2.
ПРИМЕЧАНИЯ
1. Оптимальные размер колонки и количество наносимого белка для данного препарата катионообменника в каждом случае необходимо определить в предварительных экспериментах.
2. Катионообменные целлюлозы при регенерации обрабатывают так же, как при подготовке колонки к хроматографии.