Аминокислоты, пептиды и белки - Дэвени Т., Гергей Я. 1976

Газохроматографический анализ производных аминокислот. Состояние проблемы. Возможности и ограничения метода
Пиролиз аминокислот

В результате пиролиза органических соединений образуются разнообразные летучие продукты, которые могут быть разделены ГХ. Во многих случаях получают характерные пиролитические хроматограммы, по которым можно установить исходную молекулу. Как впервые было показано Янаком [41] и позднее Улехла [89], это справедливо и для многих аминокислот. Вид пиролитической хроматограммы, так же как тип образующихся продуктов и их количественный состав, всегда сильно зависит от конкретных условий пиролиза. Так, при низкой температуре пиролиза (300° С) Винтер и Альбро [128] получили в основном амины. Исследования различных смесей аминокислот привели к заключению, что в силу такой заметной зависимости от условий реакции допустимы только качественные выводы. Тем не менее при использовании точно воспроизводимых условий было показано, что индивидуальные аминокислоты и даже относительно простые смеси можно количественно определять по пиролитическим хроматограммам [28]. Большим преимуществом метода является сравнительно малое количество требуемого для хроматографии материала. Все же вполне очевидно, что пиролитический анализ более сложных смесей аминокислот представляет собой трудную задачу. Только дальнейшие эксперименты покажут, возможно ли при наложении пиков проводить идентификацию и количественно определять аминокислоты в смеси.

Так как в подобных исследованиях других классов соединений было показано, что среди продуктов распада характерными являются как раз наименее летучие, то желательно использовать колонки с высокой разрешающей способностью и работать в режиме с программированием температуры. В таких экспериментах наиболее эффективна капиллярная хроматография с программированием температуры или с поддерживанием постоянной температуры пиролиза. Подбирая подходящие металлические сплавы и нагревая их индукционным методом до точки Кюри, можно обеспечить достаточно быстрый и воспроизводимый нагрев для пиролиза. Другое необходимое требование заключается в очень малой толщине слоя вещества, подвергающегося пиролизу: исследуемый раствор наносят на металлические пластинки толщиной 0,2 мм, шириной 5 мм и длиной 20 мм, после чего их высушивают и помещают в индукционное устройство для ввода образца. Покрытие пластинки благородными металлами может оказаться очень полезным, так как при этом уменьшаются нежелательные побочные эффекты, возникающие при нагревании металлической поверхности.