Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Аналитические методы
Определение белка, присоединенного к твердому носителю
Определение аминогрупп реакцией с хлоранилом

Это быстрый метод обнаружения свободных аминов и первичных или вторичных аминогрупп на смоле может быть использован для контроля полноты протекания реакции конденсации в твердофазном синтезе пептидов или при блокировании аминогрупп.

Реагенты.

Насыщенный раствор хлоранила (2,3,5,6-тетрахлоро-1,4-бензохинон) в толуоле.

Методика.

1. Помещают в небольшую пробирку 1 мг смолы с пептидом.

2. Для обнаружения первичных аминогрупп добавляют 200 мкл ацетальдегида, для вторичных — 200 мкл ацетона.

3. Приливают 50 мкл раствора хлоранила и размешивают 5 мин при комнатной температуре.

В присутствии свободных аминогрупп на поверхности смолы образуется зеленая или голубая окраска. Чувствительность 5 мкмоль/г смолы, т. е. приблизительно такая же, как у нингидриновой реакции.