Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Методы твердофазного анализа аминокислотной последовательности
Материалы
Носители

Шарики полистирола (сополимер стирола с 1% дивинилбензола) (марка Biobeads S-XI, minus 400 меш, фирма BioRad Laboratories). Непосредственно перед использованием их несколько раз промывают бензолом, хлороформой, диоксаном, метанолом. Хранят при 4 °С. (Марка Biobeads S-XI, 200—400 меш, хлорометированный, фирма BioRad Laboratories.)

Аминополистирол (АПС) и триэтилентетраминполистирол (ТЭТА-полистирол) (фирма Pierce). Поскольку качество коммерческих образцов носителей может меняться, а их устойчивость на воздухе ограниченна, рекомендуется синтезировать эти смолы из полистирола, как указано ниже, и хранить их под азотом в ампулах при —20 °С.

Стекло с контролируемым размером пор Corning CPG-10, 200—400 меш (фирмы Electronucleonics, Serva, Pierce, Machery-Nagel). Доступны стекла CPG с различными размерами частиц и пор. Чаще всего используют шарики с диаметром 40—80 мкм (200—400 меш) с номинальным диаметром пор 75 А. В последнее время стали использовать частицы с большим диаметром пор (85—240 А). Считается, что к частицам с большим диаметром пор лучше присоединяются объекты с большой длиной полипептидной цепи (белки) [41]. Однако наш опыт не подтверждает это мнение.

3-Аминопропильное стекло (АПС), 10/75, 200—400 меш (фирма Pierce) и β-N-Аминоэтил-(3-аминопропил)стекло(β-АПС), 200—400 меш (фирма Pierce). Следует использовать только бесцветные АПС или ß-АПС. Образцы стекол нашего собственного изготовления (см. ниже) дают более воспроизводимые результаты и лучшие выходы присоединения полипептидов.