Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Методы твердофазного анализа аминокислотной последовательности
Отщепление на твердофазном секвенаторе
Программа работы секвенатора

Программы анализа различаются в зависимости от прибора, растворителей, и буферов, используемых на стадии присоединения ФИТЦ. Перед работой заполненную реакционную колонку и трубки подачи реагентов промывают всеми используемыми растворителями (например, метанолом и 1,2-дихлороэтаном). В двухколоночном варианте секвенатора анализ на первой колонке начинается с промывки ее метанолом, после чего проводится реакция конденсации (подачи буфера и раствора ФИТЦ). В это же время вторая колонка промывается 1,2-дихлороэтаном, затем следует промывка ТФУ. При необходимости вторую колонку можно использовать в качестве автоматического конвертора. Тиазолинон, поступивший на вторую колонку после первого цикла, превращают в ФТГ, проводя одновременно стадию карбамоилирования второго цикла на первой колонке (см. ниже). Программа микроанализа приведена на рис. 12.5, а ее вариант применительно к секвенатору фирмы LKB описан в табл. 12.2.