Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Методы твердофазного анализа аминокислотной последовательности
Отщепление на твердофазном секвенаторе
Отщепление анилинотиазолинона

В твердофазном методе для циклизации применяется ТФУ. Важное значение имеет время реакции отцепления, количество добавляемой кислоты: короткое время отщепления приводит к неполной циклизации, длительное — вызывает неспецифическое расщепление пептидных связей и рост загрязнения отщепленных тиазолинонов. Рекомендуется проводить циклизацию в течение 8 мин при 45 °С. Оптимальное время добавления кислоты можно определить, используя брадикинин, имеющий остатки пролина в положениях 2, 3 и 7. Время реакции считается достаточным, если в четвертом цикле отщепления содержится не более 10% остаточного пролина. Кроме того, выход третьего остатка пролина (седьмая N-концевая аминокислота) не должен резко упасть по сравнению с содержанием предыдущих остатков, пролина. Отщепление при помощи ТФУ становится более эффективным, если перед добавлением кислоты колонку продуть азотом [43].