Практическая химия белка - А. Дарбре 1989
Определение аминокислотной последовательности с использованием 4-диметиламиноазобензол-4'-изоцианата (в ручном варианте)
Введение
Дж.-Ю. ЧАНГ (J.-Y. CHANG, Pharmaceuticals Research Laboratories, CIBA-GEIGY Limited, 4002 Basle, Switzerland)
Определение аминокислотной последовательности пептидов деградацией по методу Эдмана основано на идентификации отщепленных фенилтиогидантоинов (ФТГ) аминокислот [11] по поглощению в УФ-свете (λmах = 269 нм, ε = 16000). В модификации метода с использованием вместо фенилизотиоцианата (ФИТЦ) 4-диметиламиноазобензол-4'-изотиоцианата (ДАБИТЦ) образующиеся аминокислотные производные 4-диметиламиноазобензол-4'-тиогидантоины (ДАБТГ) — окрашенные соединения с λmах = 520 нм (в кислой среде) и ε = 47 000. Идентификация ДАБТГ-производных амиyокислот в видимой области удобна и возможна на более высоком уровне чувствительности, чем для ФТГ-производных. ДАБТГ-производные нашли применение как для N-концевого анализа пептидов [6], так и для определения аминокислотной последовательности.
Разработана методика, комбинирующая два типа конденсации ДАБИТЦ—ФИТЦ для жидкофазного [5, 7, 10] и твердофазного [4, 7] методов анализа.