Практическая химия белка - А. Дарбре 1989
Определение аминокислотной последовательности с использованием 4-диметиламиноазобензол-4'-изоцианата (в ручном варианте)
ДАБИТЦ - ФИТЦ-методика в твердофазном варианте
Присоединение пептида или белка к активированному с помощью ДИТЦ аминостеклу и цикл твердофазной деградации по ДАБИТЦ—ФИТЦ-методике проводят, как изображено схематически на рис. 14.2. Конденсация пептида с твердым носителем и последующий анализ последовательности осуществляют в пробирках со стеклянными пробками, на дне которых находится «магнит» (2X6 мм). Помещают пробирку в нагревательный блок (52 °С) над магнитной мешалкой. На каждой стадии сушки используют стеклянную пробку (С-10) с пористым фильтром (D2), чтобы предотвратить потери стеклянных шариков. Стеклянная матрица не должна подвергаться сильному перемешиванию во избежание растирания в порошок.
* Идентификация ДАБТГ-аминокислот описана в тексте.
РИС. 14.2. Схема 2. Последовательность операций в иммобилизации пептида на твердом носителе (а) и цикле твердофазной деградации с использованием ДАБИТЦ — ФИТЦ-реагента (б).