Практическая химия белка - А. Дарбре 1989
Применение масс-спектрометрии электронного удара для определения аминокислотной последовательности пептидов и белков
Интерпретация масс-спектров
Введение 2Н-метки
Для повышения надежности определения аминокислотной последовательности пептиды модифицируют, применяя 2Н6-уксусный ангидрид или 2Н3-метилиодид вместо обычных реагентов. Анализ масс-спектров этих производных приводит к более достоверным результатам. Рассмотрим следующий пример, иллюстрирующий высказанное выше. Ион с m/z 126 в масс-спектре перметилированного ацетилпептида может принадлежать остатку N-концевой пирролидонкарбоновой кислоты, остатку аспарагина, образовавшемуся в результате N—С-разрыва или N-концевому остатку серина, который потерял молекулу метанола. Анализ масс-спектров 2Н-меченых производных позволяет однозначно установить природу данного иона. Если использовать для химической модификации данного пептида немеченый метилиодид и 2Н6-уксусный ангидрид, то в первых двух случаях масса рассматриваемого иона не изменится, а в третьем случае вместо иона с m/z 126 образуется ион с m/z 129. Если модифицировать пептид 2Н3-метилиодидом и немеченым уксусным ангидридом, то в первых двух случаях должен образоваться ион с m/z 129, а в третьем случае — с m/z 132.