Практическая химия белка - А. Дарбре 1989
Фрагментация полипептидов химическими методами
Другие методы химического расщепления пептидных связей
Расщепление по остатку гистидина
Двойная связь в у—δ-положении имидазольного кольца гистидина в сущности аналогична двойной связи, присутствующей в остатках триптофана и тирозина. На практике пептиды расщепляются по остатку гистидина под действием N-бромосукцинимида, хотя и с меньшим выходом, чем по триптофану [170, 171]. Предположительный механизм реакции, по-видимому, включает образование пятичленного иминолактона, который легко гидролизуется в кислой среде по аналогии с расщеплением пептидов по триптофану и тирозину [181]. Расщепление гистидинсодержащих пептидов N-бромосукцинимидом проводят в пиридин-ацетатном буфере (pH-3) при 100°С в течение 1 ч.
С целью исключить возможность расщепления по триптофану и тирозину О-ацилируют остатки тирозина [170] и избирательно алкилируют остатки триптофана с помощью 2-гидрокси-5-нитробензилбромида [206]. Из-за низкого выхода и окисления боковых групп некоторых аминокислот, в особенности серусодержащих, эта методика редко применяется для фрагментации белков и пептидов.