Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Дисульфидные связи
Расщепление полипептидной цепи до коротких цистинсодержащих пептидов
Гидролиз пепсином

Согласно методике Спакмена и сотр. [41], впервые использованной при изучении рибонуклеазы А, 0,1 %-ный раствор белка в 0,05 М Na-цитратном буфере (pH 1,0) инкубируют с пепсином при соотношении фермент : субстрат — 1 : 50 при 25 °С в течение 16 ч. Последующие модификации методики включают увеличение концентрации фермента, проведение инкубации при 37 °С, уменьшение времени гидролиза, применение других растворителей, например 5%-ной муравьиной кислоты и 0,03 М НСl [30, 34, 42, 43]. Гидролиз останавливают замораживанием, в случае необходимости раствор лиофилизируют. Полезную информацию можно найти в разд. 3.6.3.



Для любых предложений по сайту: [email protected]