Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Аналитические методы
Определение белка, присоединенного к твердому носителю
Белок, связанный с сефарозой

Реагент. Растворяют 50 г полиэтиленгликоля (М 20 000) в 50 мл воды.

Методика. Помещают суспензию сефароза — связанный белок (0,2 мл — 1 мл) в кварцевую кювету (с длиной пути луча 1 см). Добавляют раствор полиэтиленгликоля шприцем до конечного объема 3 мл. Перемешивают аккуратно, чтобы не образовались пузырьки воздуха. Измеряют поглощение при 280 нм против образца смолы без белка.

Строят линейный график зависимости поглощения от концентрации белка. Чувствительность 20 мкг белка/0,5 мл сефарозы. Градуировочный график может быть построен по данным, полученным путем добавления увеличивающихся количеств белка к суспензии геля (использовалась апоглицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа).