Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Анализ фенилтиогидантоинов аминокислот
Аналитические методы
Тонкослойная хроматография

Существует практическое руководство по одномерному анализу ФТГ-производных аминокислот методом ТСХ [3]. Большое достоинство метода заключается в возможности одновременного анализа сразу нескольких остатков, отщепленных на секвенаторе. Следует анализировать ≥1 нмоль образца; предпочтительнее иметь дело с 50—70 нмоль. Наличие остаточных аминокислот сильно затрудняет интерпретацию результатов, поэтому для их подтверждения рекомендуется использовать второй метод. Для определения ФТГ-Arg и ФТГ-His следует проводить ВЭЖХ или ставить обратный гидролиз с последующим аминокислотным анализом продуктов гидролиза.

Двумерное разделение чрезвычайно удобно для идентификации, так как на одну сторону пластинки можно нанести смесь стандартов, а на другую — образец. Чувствительность определения повышается при добавлении к хроматографическому растворителю флуоресцирующего индикатора. Анализ можно проводить на листах полиамида (50X50 мм), а хроматографию — в небольших закрытых сосудах. Эта методика не позволяет обнаруживать ФТГ-Arg и ФТГ-His, но она используется в некоторых лабораториях как ценное дополнение к другим методам.



Для любых предложений по сайту: [email protected]