Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Определение состава белковых олигомеров. Получение мономеров и полипептидных цепей
Получение мономеров с целью секвенирования
Восстановление сульфоксидов N-метилмеркаптоацетамидом

По результатам аминокислотного анализа трудно оцепить степень окисления остатков метионина на стадии подготовки белковых препаратов хотя бы потому, что в процессе гидролиза может идти обратная реакция частичного восстановления [156]. Однако о потерях метионина можно судить по низкому выходу при расщеплении бромоцианом [66]. Низкий выход цистина также может быть обусловлен образованием сульфоксида цистеина [85] или алкилцистеина [86]. Частичное окисление существенно затрудняет идентификацию соответствующих ФТГ-аминокислот при глубоком секвенировании. Из множества других реагентов N-метилмеркаптоацетамид наиболее эффективен как восстановитель S-оксида метионина [80]. Реакцию метионин-S-оксида (1 мг/мл) с 0,7—2,8 М N-метилмеркаптоацетамидом проводят при pH 2,6—8,5 и 37 °С в течение 12—14 ч в атмосфере азота.

Восстановление сульфоксида S-карбоксиметилцистеина в пептидах и белках проводят в те же условиях, однако время реакции увеличивают в 5 раз.

При окислении белка надмуравьиной кислотой метионин превращается в стабильный S,S-диоксид. Перед стадией окисления [87] остаток триптофана переводят в оксиндолил-3-аланин [155] или кинуренин [11], более стабильные в условиях деградации по Эдману. Метод, предложенный в работе [155], более специфичен (разд. 2.5.3). При превращении триптофана побочной реакцией является образование метионин-S-оксида, который может быть избирательно восстановлен в метионин [156].