Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Анализ аминокислотной последовательности на микроуровне с использованием газофазного пептидо-белкового секвенатора
Обсуждение
Химические аспекты

Недавно было показано, что на стадии присоединения ФИТЦ к аминогруппе пептида вместо паров водного ТМА можно использовать пары безводного ТМА без заметного влияния на постадийный выход, чувствительность анализа и уровень фона (С. Р. Hewick, М. Hunkapillеr, неопубликованные данные). Безводное основание применяли при анализе как коротких пептидов, так и белков. Аминокислотный фон, полученный при определении последовательности миоглобина в полностью безводных условиях оказался не меньшим, чем при проведении процесса с обычным водным раствором ТМА. Эти результаты указывают, что появление фона аминокислот в ГФ-приборе вызвано в основном не гидролизом пептидной связи, а другими химическими реакциями, как предполагалось ранее и для системы с вращающимся реактором [1].